Applicable pour

• Les protéines recombinantes produites en E.coli (expression cytoplasmique ou périplasmique) et P.pastoris (sécrétion).

Services proposés

• Construction de systèmes d’expression de protéines (E. coli ou P. pastoris): 
  • design de vecteurs incluant la sélection entre différentes souches et vecteurs, le choix du marqueur de sélection, du promoteur, du peptide signal, des séquences codantes ainsi que du mode d’optimisation de codons.
  • transformation, criblage de clones et sélection des clones surproducteurs.
• Fermentation:
  • sélection des conditions optimales de production
• Récolte et extraction:
  • optimisation des conditions de récolte des cellules ou du milieu de culture
  • développement des conditions d’extraction: traitement haute pression, choc osmotique, lyse chimique
  • préparation, solubilisation et renaturation des corps d’inclusion
• Chromatographie: 
  • criblage à haut débit de résines et des conditions chromatographiques (charge, élution…)
  • validation du choix des résines and affinage des conditions opérationnelles sur petites colonnes
• Ultrafiltration and microfiltration: 
  • sélection des membranes et des conditions opérationnelles
• Transfert industriel:
  • étude de mise à échelle (génie chimique)
  • suivi multi-paramétrique du procédé de production

Délivrables

• Banques cellulaires (50 fioles) avec certificat d’analyse
• Matériel purifié pour les essais in vitro (tests d’activité, études de formulation…).
• Rapport de développement comprenant:
  • la méthode de production
  • les paramètres opérationnels aux différentes étapes du procédé de fabrication  
• Un procédé transférable à la plateforme de production BPL d’Xpress Biologics
• Un procédé compatible et transférable à l’échelle de production BPF